Com exceção do colesterol total, HDL-colesterol e triglicérides, que por conseqüência da distribuição randômica apresentaram valores significativamente maiores (p£ 0,05) para o grupo F, nenhuma diferença significativa foi observada entre os dois grupos nos demais parâmetros avaliados.

Em todos os lotes dos produtos fermentados, processados e utilizados durante os experimentos, foram realizadas, em triplicata, as contagens de células viáveis (cocos e bacilos), as quais se apresentaram sempre na ordem de 10⁸ UFC/ml, tanto para o E. faecium como para o L .jugurti ,número suficiente para que o produto pudesse ser caracterizado como probiótico (15).

Após 3 semanas de consumo do produto fermentado, o grupo F apresentou valor médio de colesterol total sem diferença significativa do valor inicial e mesmo do valor observado para o período de 6 semanas de estudo, isto é, o nível de colesterol total permaneceu inalterado durante todo o período de estudo (Tabela 2). O mesmo não foi observado para o grupo que consumiu o placebo (grupo P) cujo valor de 3 semanas foi significativamente maior (p£ 0,001) que o valor inicial e significativamente menor (p £ 0,05) que o valor observado ao final de 6 semanas, demonstrando, ao contrário do grupo F, que os níveis de colesterol total aumentaram em torno de 18% ao longo do estudo.

TABELA 2
Concentração de lípides séricos nos grupos de indivíduos que consumiram
produto fermentado e placebo, durante o período de estudo

Com relação ao HDL-colesterol, os resultados mostraram que o grupo F apresentou uma elevação desses níveis, chegando a um aumento de cerca de 10% ao final de 6 semanas (Tabela 2), enquanto que o grupo P apresentou os valores inalterados durante todo o período.

Também na Tabela 2 encontram-se os resultados referentes à fração LDL, cujos valores apresentaram-se sem diferença significativa, durante o período de estudo, para o grupo F, mas crescentes para o grupo P, indicando neste caso um aumento de aproximadamente 30% na 6^a semana, em relação ao valor inicial. Esse resultado é devido, em parte, ao aumento do colesterol total observado para o grupo P.

Para os triglicérides, os níveis permaneceram sem alterações durante as 6 semanas de estudo, tanto para o grupo F como para o grupo P, demonstrando que o produto fermentado não exerceu nenhum efeito sobre esse lípide sérico.

Os valores das frações HDL e LDL quando relacionados com o colesterol total ou entre si, permitem o estabelecimento do grau de risco coronariano (14). Com base nos valores de referência foi possível calcular o grau de risco coronariano para os dois grupos em estudo. Pode-se notar na Figura 1 que para o grupo F, no início do estudo, 32% dos indivíduos apresentavam um grau de risco moderado (RM) e ao final do estudo esse percentual caiu para 14%. Consequentemente o percentual de indivíduos com risco padrão (RP) ou baixo (RB) aumentou de 68% para 86%. Sem dúvida, o fato da grande maioria dos indivíduos do grupo F terem, ao final do estudo, se caracterizado como indivíduos de risco coronariano padrão ou baixo se deve ao aumento dos níveis da fração HDL e a manutenção dos níveis de LDL e de colesterol total.

FIGURA 1
Distribuição percentual dos indivíduos em estudo em função do
grau de risco coronariano e do tempo de experimentação


GF = grupo que consumiu produto fermentado; GP = grupo que consumiu placebo.
RM = risco moderado; RP/RB = risco padrão ou risco baixo

Por outro lado, os indivíduos do grupo P que no início do estudo apresentavam-se todos situados dentro do risco padrão ou baixo, ao final da 6^a semana apenas 54% permaneceram nessa faixa de risco e os restantes (46%) passaram para a faixa de risco moderado, fato este explicado certamente pelo aumento da fração LDL observado para o grupo em questão.

Em trabalho semelhante realizado por Agerbaek et al (16), os autores, utilizando também E.faecium e com um planejamento experimental de 6 semanas, encontraram que o produto fermentado levou a uma redução nos níveis de colesterol total, enquanto que o placebo fez com que esses valores permanecessem inalterados. Entretanto, é válido salientar que esses autores utilizaram o S.thermophilus como microrganismo associado ao E. faecium e o leite de vaca como matéria-prima, que segundo alguns pesquisadores, apresenta por si só um "fator de redução do colesterol" (17-19). Esse estudo foi refeito por outros pesquisadores, apenas aumentando o tempo de observação de 6 semanas para 6 meses. Os autores concluíram que a redução da fração LDL no grupo que consumia o produto fermentado, só era verificada até o primeiro mês de estudo. A partir disso, os níveis dessa fração passaram a apresentar-se sem diferença significativa para os dois grupos em estudo (20).

Desde a publicação do trabalho pioneiro de Mann & Spoerry (21), demonstrando o efeito hipocolesterolêmico de produtos fermentados com L. acidophilus, muitos outros trabalhos nesta mesma linha têm sido apresentados e com eles um grande número de mecanismos foram sugeridos, sem, entretanto, nenhum ter sido comprovado até o presente momento.

Sendo assim, torna-se muito difícil tentar propor alguma explicação viável para os efeitos observados nesse estudo, principalmente pelo fato do efeito hipocolesterolêmico não ter sido explicitamente evidenciado, mas sim de uma forma indireta (impedindo o aumento do colesterol total no grupo F em relação ao grupo P). Por outro lado, o efeito positivo do aumento da fração HDL permite supor uma provável ação do produto fermentado ao nível da síntese do colesterol, não se aplicando neste caso em particular, nenhum dos mecanismos baseados na desconjugação de sais biliares pelos microrganismos do produto, condição que ocasionaria uma diminuição na absorção do colesterol exógeno (3, 22, 5). Entretanto, os resultados desse estudo, permitem afirmar que os efeitos observados para o grupo F são, sem dúvida, dependentes da presença dos microrganismos no produto fermentado, cuja ação poderia ser uma decorrência direta dessa presença ou então devido a algum metabólito produzido durante o processo fermentativo.

Por outro lado, é sabido que a soja apresenta componentes isoflavônicos que desempenham papel importante na redução do colesterol (23, 24). Entretanto, não se pode atribuir a elas, nem mesmo de forma parcial, os efeitos verificados no grupo F, uma vez que os mesmos efeitos não foram observados no grupo P. Isso pode ser explicado provavelmente pelo fato das isoflavonas terem sido eliminadas, em grande parte, no decorrer do processamento do "leite" (25) que se constitui na matéria-prima básica do produto fermentado em estudo.

CONCLUSÕES
Em conclusão, o consumo de 200 ml/dia do produto fermentado com E. faecium e L. jugurti, por um período de 6 semanas, mostrou-se capaz de impedir um aumento do colesterol total e da fração LDL e de propiciar uma elevação em cerca de 10% na fração HDL. Essa situação permitiu que 86% dos indivíduos apresentassem grau de risco coronariano padrão ou baixo ao final do estudo, evidenciando que o produto pode conferir um "fator de proteção" a doenças ateroscleróticas. Entretanto, esses resultados não podem ser extrapolados para indivíduos do sexo feminino, hipercolesterolêmicos e com idade inferior a 40 ou superior a 55 anos, uma vez que o estudo foi conduzido apenas com pessoas do sexo masculino, normocolesterolêmicas e com idade entre 40 e 55 anos.

AGRADECIMENTOS
Aos técnicos de laboratório Roseli A. Pinto e Valéria Cristina O.Alves, ao grupo de voluntários do estudo, ao PADC/FCF-UNESP e à FAPESP.

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Nota

^* Protocolo aprovado pelo Comitê de Ética em pesquisa com seres humanos da Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Araraquara-UNESP.

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