Venezuela, 24 de Abril de 2014

Año 2011, Volumen 61 - Número 4
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Trabajos de Investigación
Detección de Listeria monocytogenes en queso blanco criollo, mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR)

Luís Guillermo Ramírez Mérida, Alba Morón de Salim, Ana Yudith Alfieri Graterol, Orlando Gamboa
Departamento de Biología, Departamento de Bioquímica, Facultad de Ciencias y Tecnología (FACYT), Departamento de Microbiología, Facultad de Ciencias de la Salud Universidad de Carabobo Sede Valencia, Departamento de Ciencias de los Alimentos, Facultad de Ingeniería de Alimentos, Canoabo, Universidad Simón Rodríguez. Venezuela

RESUMEN
Detección de Listeria monocytogenes en queso blanco criollo, mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR)

La reacción en cadena de la polimerasa, conocida como PCR, es un método que permite replicar miles de veces, en pocas horas e in vitro, pequeñas cantidades de ADN. La aplicación de métodos rápidos y sensibles, para detectar Listeria monocytogenes en muestras de queso blanco, permitirá un mejor control microbiológico del proceso de producción. Se aplicó PCR a 30 muestras de queso blanco, de una quesera de Valencia Estado Carabobo. Se detectó especificidad y sensibilidad para PCR mediante el empleo de la cepa control Listeria monocytogenes 446. Extracción de ADN según metodología descrita por Torres y col., Marcador de peso molecular de 100 pares de base. Se emplearon: cuatro cebadores del gen hlyA de listeriolisina O; iniciadores L1/U1 para banda 938 pb y LF/LR para banda 750 pb del gen hlyA. Estadístico EpiInfo V6 para concordancia de observaciones en geles, mediante coeficiente Kappa (K). Resultados: 8 de las 30 muestras de queso analizadas, mostraron crecimiento presuntivo de Listeria spp en Agar PALCAM. De las cuales 2 de las muestras no pertenecian al género Listeria; en las 6 restantes las pruebas de confirmación arrojaron que: 2 eran L. monocytogenes, 3 L.ivanovii y 1 L. seeligeri. Mediante PCR 2 muestras resultaron positivas para L. monocytogenes al amplificar la banda 938 pb para Listeria y banda 750 pb para la especie monocytogenes. Se concluye que PCR demostró ser altamente específico y sensible para L. monocytogenes, teniendo ventaja sobre agar PALCAM al evidenciar la presencia especifica del patógeno en un tiempo relativamente corto.

Palabras clave: Reacción en cadena de la polimerasa, sensibilidad, control microbiológico, Listeria monocytogenes, queso blanco fresco.



Recibido: 16/04/2010
Aceptado: 30/07/2010



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